奶牛隐孢子虫SYBR Green Real-time PCR检测方法的建立

• 作者: 单虎 孙伟东 徐守振 王浩 陈莉
• 来源期刊: 青岛农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 奶牛 隐孢子虫 实时荧光定量PCR SYBR Green 检测
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 232-236
• 分类号: S852.72+3
• 字数: 3125字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/J.ISSN.1674-148X.2010.03.014

摘要

为建立一种方便快捷的检测奶牛隐孢子虫的实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法,根据GenBank中已发表的隐孢子虫18s rRNA基因设计一对引物,并以从卵囊中提取的DNA为模版,初步建立了检测奶牛隐孢子虫的SYBR Green Real-time PCR方法,进而对采集的奶牛粪便进行了特异性、敏感性和重复性检测.结果显示,本研究建立的Real-time PCR方法敏感性高,最低检测阈为10个拷贝的质粒DNA和1g粪便中的10个卵囊,扩增产物的特异性良好,重复性试验的标准差为0.494,重复性良好.研究表明,建立的Real-time PCR快速、特异、敏感,可用于奶牛隐孢子虫病的流行病学调查.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	单虎	青岛农业大学动物科技学院	183	631	12.0	17.0
2	徐守振	青岛农业大学动物科技学院	38	183	9.0	11.0
3	陈莉	青岛农业大学动物科技学院	34	93	5.0	8.0
5	孙伟东		5	14	2.0	3.0
8	王浩		3	15	2.0	3.0