携带人Sox2和EGFP基因慢病毒表达载体构建

• 作者: 史俊文 姚开泰 姚志芳 王赫 申红芬 肖东 肖高芳
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Sox2 EGFP 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏论著
• 页码范围: 261-263,封3
• 分类号: R34
• 语种: 中文

摘要

目的 构建携带人Sox2和EGFP基因的慢病毒表达载体pFUSGW.方法 Xho Ⅰ线性化pLentiEF1a-SOx2-IRES-EGFP,回收片段并补平Xho Ⅰ切口,接着BamH Ⅰ酶切该片段,回收2.356 kb片段而获连接用Sox2-IRES-EGFP;EcoR Ⅰ线性化pFUGW,回收并补平EcoR Ⅰ切口,然后BamH Ⅰ酶切该片段,回收9.174 kb片段获连接用载体片段,最后使用DNA连接试剂盒(TaKaRa)中的Solution Ⅰ将其与连接用Sox2-IRES-EGFP连接,连接产物转化,次日挑选单菌落,提取质粒并行酶切鉴定.所构建载体命名为pFUSGW.获pFUSGW后,按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒包装和确认慢病毒是否成功生产;携带Sox2和EGFP基因的慢病毒感染小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)、人胚肺成纤维细胞(HLFs)和人神经胶质瘤细胞(U87)以建立相应病毒感染体系.结果 酶切证实成功构建了pFUSGW,按标准程序生产的携带SOx2和EGFP基因的慢病毒上清高效率感染MEFs、HLFs及U87.结论 成功构建携带人Sox2和EGFP基因的慢病毒表达载体pFUSGW,为相关后续的研究打下了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚开泰	南方医科大学肿瘤研究所	65	406	11.0	16.0
2	肖东	南方医科大学肿瘤研究所	29	117	5.0	10.0
6	史俊文	南方医科大学肿瘤研究所	6	11	2.0	2.0
7	肖高芳	南方医科大学肿瘤研究所	6	49	2.0	6.0
8	申红芬	南方医科大学肿瘤研究所	4	46	2.0	4.0
9	姚志芳	南方医科大学肿瘤研究所	5	48	2.0	5.0
10	王赫	南方医科大学肿瘤研究所	3	7	2.0	2.0