线粒体加工肽酶干扰RNA真核表达载体的构建

• 作者: 呼格吉乐 张艳梅 邬伟 马翔凌 马飞煜
• 来源期刊: 中风与神经疾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 干扰RNA 线粒体加丁肽酶 帕金森病 载体
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 论著与经验总结
• 页码范围: 32-34
• 页数: 3页
• 分类号: R742.5
• 语种: 中文

摘要

目的 利用干扰RNA技术构建线粒体加工肽酶(mitochondfiM processing peptidases,MPPs)干扰RNA真核表达载体,探讨MPPs在神经细胞中的作用,为帕金森病的研究提供有价值的资料.方法 (1)根据Gen-Bank提供的大鼠MPPsα亚基(peptidase mitochondrial processing alpha,Pmpca)序列,设计并合成4对MPPs干扰RNA单链寡核苷酸:MPPs-SR-1113,MPPs-SR-1425,MPPs-SR-561,MPPs-SR-903.(2)使互补的单链寡核苷酸模板退火,再转化为能表达其小发卡结构RNA的DNA序列.(3)使~(PGPU6/GFP/Neo)载体的线性化.(4)shRNA与载体的连接.(5)酶切鉴定并测序鉴定结果.结果 (1)酶切结果表明,所有质粒均为阳性重组载体.(2)经鉴定证实,构建的siRNAs序列与基因库中序列完全相同,并且未发现有突变、缺失、插入等异常存在.结论 利用干扰RNA技术可成功构建MPPs干扰RNA真核表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	呼格吉乐		30	41	3.0	5.0
2	张艳梅		2	0	0.0	0.0
3	马飞煜		1	0	0.0	0.0
4	邬伟		1	0	0.0	0.0
5	马翔凌		1	0	0.0	0.0