HIV-1蛋白酶基因的克隆、蛋白表达及抗体制备

• 作者: 刘朝奇 史继静 李斌 汪锦江 陈晶
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HIV-1PR基因 原核表达 免疫原性 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 116-119
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文

摘要

目的 为了研究HIV-1蛋白酶的生物学活性,制备HIV-1 PR蛋白及其特异性抗体.方法 用PCR方法扩增编码PR的基因序列,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中,并表达HIV-1 PR蛋白,用His抗体为一抗做Western blot鉴定目的 蛋向.以纯化的目的 蛋白为抗原免疫日本大耳白兔,制备多克隆抗体.通过酶联免疫吸附实验(ELISA),免疫细胞化学法检测抗体滴度及其特异性.结果 原核表达载体pET28 a(+)-PR成功构建,并可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,得到的PR蛋白经SDS-PAGE和Western blot鉴定正确.用纯化蛋白免疫家兔,制备的多克隆抗体具有较强免疫特异性.结论 得到纯化的HIV-1PR蛋白,制备的多克隆抗体能够检测自然状态下病毒蛋白PR,为进一步研究HIV-1奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘朝奇		171	552	10.0	15.0
2	史继静		19	94	6.0	9.0
3	陈晶		15	22	2.0	4.0
4	李斌		20	89	4.0	9.0
5	汪锦江		1	0	0.0	0.0