抑制RAGE表达的siRNA重组腺病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 朱云霞 束婷婷 韩晓
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 晚期糖基化终末产物受体 腺病毒载体 小干扰RNA 胰岛β细胞
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 23-27
• 页数: 5页
• 分类号: Q785
• 字数: 4092字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2010.01.005

摘要

目的 构建特异性针对细胞膜上晚期糖基化终末产物受体(RAGE)的小干扰RNA(siRNA)腺病毒载体,鉴定其对大鼠胰岛β细胞系INS-1细胞RAGE表达的影响.方法 设计并合成针对大鼠RAGE基因的siRNA的靶DNA序列,克隆于穿梭载体pAdTrack中,与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组,脂质体法转染至QBI293A细胞中包装,获得RAGE-siRNA的重组腺病毒,荧光显微镜观察RAGE-siRNA感染INS-1细胞后绿色荧光蛋白(GFP)的表达,Western印迹检测RAGE的蛋白表达.结果 成功制备RAGE-siRNA重组腺病毒,在INS-1细胞中RAGE-siRNA感染效率达到90 %以上,并能够抑制INS-1细胞RAGE的表达.结论 成功构建了携带RAGE的siRNA重组腺病毒载体,能有效沉默INS-1细胞中RAGE的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩晓	南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室	38	125	7.0	10.0
2	朱云霞	南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室	15	26	3.0	4.0
3	束婷婷	南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室	2	3	1.0	1.0