拟南芥DBB 1 a(double B-box 1a)蛋白的表达、纯化及Western blotting检测

• 作者: 刘选明 唐东英 屠小菊 李秀山 汪启明 罗泽宇 赵小英 邓克勤
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: DBB1a 原核表达 蛋白纯化 Western blotting
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 224-228
• 分类号: Q786
• 字数: 3511字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2010.02.016

摘要

PCR扩增拟南芥(Arabidopsis thaliana)DBB1a cDNA的保守区段(GenBank登录号:AT2G21320),转化到冷诱导表达载体pCold TF上,构建pCold-DBB1a重组质粒,转化大肠杆菌DH5a.15℃下IPTG诱导表达融合蛋白,并通过SDS-PAGE检测.证实目的蛋白以可溶形式在约20 kD处高效表达,与预期蛋白大小相吻合.表达蛋白经Ni琼脂糖凝胶亲和层析纯化,SDS-PAGE及Western blotting检测证实纯化后获得高纯度融合蛋白,这为进一步研究DBB1a功能奠定了基础.