野生毛木耳ISSR-PCR反应体系的建立与优化

• 作者: 崔宝凯 戴玉成 杜萍
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: 野生毛木耳 ISSR-PCR 单因子试验 体系优化
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 130-137
• 分类号: S6
• 字数: 6050字
• 语种: 中文

摘要

为获得条带清晰,重复性好,多态性高的野生毛木耳ISSR扩增结果,通过单因子试验对ISSR-PCR反应条件进行了优化.确定了ISSR分析的最佳PCR条件:25 μL 反应体系中模板DNA 25 ng、dNTPs 0.24 mmol/L、Taq DNA 聚合酶1 U、Mg2+0.9 mmol/L、引物2 μmol/L、10× PCR buffer 2.5 μL、ddH2O 12.6 μL.最佳退火温度因不同的引物而定,最佳循环次数为35次.在此基础上初步筛选出25条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物.这一优化体系的建立为进一步利用ISSR标记技术进行野生毛木耳种质鉴定及遗传多样性分析提供了一个适合的程序.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔宝凯	北京林业大学微生物研究所	67	869	16.0	26.0
2	杜萍	北京林业大学微生物研究所	6	57	4.0	6.0
6	戴玉成	北京林业大学微生物研究所	45	1937	18.0	44.0