睾丸酮丛毛单胞菌工程菌构建及稳定性分析

• 作者: 周以飞 张剑亮 戴艺民 林江波 林龙云 潘大仁 陈建秋
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 睾丸酮丛毛单胞菌 3α-羟基类固醇脱氢酶/碳酰基还原酶(3α-HSD/CR) activator 工程菌 稳定性
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 807-814
• 分类号: S8
• 字数: 5717字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.04.029

摘要

本研究根据同源重组原理,利用电穿孔法将重组质粒pKtac1-actl和pKtac1-act2分别转化睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni),经PCR和Southern blot筛选获得2株睾丸酮丛毛单胞菌基因工程菌.对这两株基因工程菌的关键酶3α-羟基类固醇脱氢酶/碳酰基还原酶(3α-hydroxysteroid dehydrogenase/carbonyl reductase,3α-HSD/CR)表达情况和细菌稳定性的分析结果表明:两株基因工程菌在没有诱导剂诱导的情况下,其3α-HSD/CR的表达量比原始菌提高了近20倍.添加抗生素进行培养,两株工程菌的activator和3α-HSD/CR表达均较稳定;而在不添加抗生素的培养基上培养时,两株工程菌的activator和3α-HSD/CR的表达变化较大,蛋白总体表达水平比添加抗生素时低.研究结果可以初步推断,3α-HSD/CR的表达受activator基因的表达调控.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林江波	福建省农科院甘蔗研究所	74	484	12.0	19.0
2	张剑亮	福建农林大学作物学院	7	94	5.0	7.0
3	潘大仁	福建农林大学作物学院	87	682	14.0	21.0
4	周以飞	福建农林大学作物学院	50	446	11.0	18.0
5	陈建秋	福建农林大学作物学院	7	31	4.0	5.0
6	戴艺民	福建省农科院甘蔗研究所	66	246	9.0	12.0
7	林龙云	福建农林大学作物学院	8	40	4.0	6.0