睾丸酮丛毛单胞菌teiR基因载体构建及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 卢文标 周以飞 林钿 潘大仁 王占成 程晓春 陈建秋 陈雅艳
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 睾丸酮丛毛单胞菌 teiR ELISA 3a-HSD/CR
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 681-686
• 页数: 6页
• 分类号: S188
• 字数: 3808字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2008.04.023

摘要

提取睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni)基因组DNA,利用PCR扩增teiR基因,将扩增产物克隆到pKtac2(含强启动子tac)和pK18中,构建重组质粒pKtac2-teiR和pKteiR100.将重组质粒分别转化大肠杆菌(Escherichia coli)HB101,提取细菌总蛋白,ELISA测定细菌总蛋白中TeiR蛋白的表达量,结果表明:含如tac强启动子的pKtac2-teiR转化大肠杆菌后,TeiR蛋白的表达量可以达到6.65 μg/mg,比pKteiR100的表达量高出0.72μg/mg.将p6(含3a-HSD/CR基因)分别和重组质粒(pKtac2-teiR和pKteiR100)共转化大肠杆菌HB101,测定细菌总蛋白中3a-HSD/CR和TeiR的表达量,结果表明:在大肠杆菌中teiR基因可以明显促进3a-HSD/CR基因的表达,pKtac2-teiR与p6共转化大肠杆菌后teiR基因的表达量比pKteiR100与p6共转化后teiR基因的表达量高,其TeiR蛋白表达量分别为5.94和5.33 μg/mg;添加终浓度1 mmol/L,的IPTG诱导,其TeiR蛋白的表达量分别为6.81和6.10 μg/mg.但是pKtac2-teiR与p6共转化后的3a-HSD/CR的表达量低于pKteiR100与p6共转化后的3a-HSD/CR的表达量,未添加IPTG诱导,3a-HSD/CR的蛋白表达量依次为1.20和1.71 μg/mg;添加终浓度为1mmol/L IPTG诱导,其3a-HSD/CR的蛋白表达量依次为1.42和1.80 μg/mg.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘大仁	福建农林大学生命科学学院	87	682	14.0	21.0
2	周以飞	福建农林大学作物科学学院	50	446	11.0	18.0
3	陈建秋	福建农林大学作物科学学院	7	31	4.0	5.0
4	卢文标	福建农林大学生命科学学院	2	11	2.0	2.0
5	程晓春	福建农林大学生命科学学院	2	11	2.0	2.0
6	王占成	福建农林大学作物科学学院	2	26	2.0	2.0
7	陈雅艳	福建农林大学作物科学学院	2	11	2.0	2.0
8	林钿	福建农林大学作物科学学院	4	16	2.0	4.0