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摘要:
构建了在甘丙肽2型受体(GalR2)N端带myc表位标签的真核表达载体,并将其转染到HEK293细胞.进而应用免疫荧光细胞化学方法结合激光扫描共聚焦显微技术观察GalR2蛋白的亚细胞分布和膜转运过程.Western blot结果发现转染组myc-GalR2蛋白水平呈高表达.myc-GalR2主要分布在细胞膜上,少量分布于胞浆中.当给予甘丙肽(10-7 mol/L)刺激后,5min时可见细胞膜上myc-GalR2明显减少,胞浆内myc-GauR2增多,15 min时膜上myc-GalR2几乎全部消失.表明GalR2受体与配体结合后发生内化,且受体蛋白内化为时间依赖性的转运过程,证实在HEK293细胞GalR2会出现配体依赖性内化.同时,以已知膜蛋白5-HT1AR的内化作为对照,可见在给予甘丙肽刺激以后,5-HT1AR没有发生内化,受体蛋白仍然表达在膜上.此外,通过测定胞内钙水平激活情况来检测其信号通路激活情况,表明myc对GalR2功能没有明显影响.
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真核表达载体
转染
HEK293细胞系
基因表达
内容分析
关键词云
关键词热度
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文献信息
篇名 甘丙肽2型受体在HEK293细胞中的表达及内化过程
来源期刊 生物物理学报 学科 生物学
关键词 表位标签 甘丙肽2型受体(GalR2) G蛋白耦联受体(GPCRs) HEK293细胞 膜转运
年,卷(期) 2010,(5) 所属期刊栏目 研究论文
研究方向 页码范围 373-379
页数 7页 分类号 Q753
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 赵春礼 45 182 8.0 11.0
2 吴波 17 34 3.0 4.0
3 徐志卿 29 45 4.0 6.0
4 吕琼 2 0 0.0 0.0
5 金艳燕 3 6 1.0 2.0
6 李晓晓 8 1 1.0 1.0
7 路雅静 2 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
表位标签
甘丙肽2型受体(GalR2)
G蛋白耦联受体(GPCRs)
HEK293细胞
膜转运
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
生物物理学报
双月刊
1000-6737
11-1992/Q
大16开
北京市朝阳区大屯路15号中国科学院生物物理研究所
1985
chi
出版文献量(篇)
1662
总下载数(次)
4
总被引数(次)
12572
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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