一种水产动物病毒现场检测免疫芯片的制备与应用

• 作者: 徐晓丽 战文斌 绳秀珍
• 来源期刊: 海洋与湖沼
• 学科: 生物学
• 关键词: 单克隆抗体 抗体芯片 白斑综合征病毒 淋巴囊肿病毒 琼脂糖凝胶
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 698-706
• 分类号: Q789
• 语种: 中文

摘要

采用原子力显微镜对氨基化玻片及6种不同方法修饰玻片进行表面特征分析,并比较了硝酸纤维素(NC)膜、PvDF膜以及以上不同修饰玻片对抗体的固定效率、固定效果,最终选择琼脂糖修饰玻片作为芯片载体.将纯化后的兔抗血清(捕获抗体)点样至琼脂糖修饰玻片上,制备免疫芯片,与待检样品(病毒感染的靶器官组织)匀浆液孵育形成复合物,该复合物被辣根过氧化物酶(HRP)标记的特异性单克隆抗体(单抗)识别,经底物显色,得到肉眼可见的检测结果.通过改变芯片制备及应用过程中的具体条件参数,对各条件进行了优化,并采用生物素.链亲和素(BAS)标记特异性单抗作为检测抗体以提高检测灵敏度.基于此夹心免疫分析原理制备的WSSV、LCDV现场检测免疫芯片,病毒的最低检出量分别为82.50 ng/ml、0.88 μg/ml,在一定的抗原浓度范围内,病毒浓度的对数值与信号强度呈线性关系;采用BAS放大检测信号后,病毒的最低检出量为12.38 ng/ml、0.22 μg/ml.该免疫芯片与酶联免疫吸附法(ELISA)及免疫荧光法(IFAT)对同种样品的检测结果高度一致.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	绳秀珍	中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室	56	404	11.0	18.0
2	战文斌	中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室	97	1155	20.0	30.0
3	徐晓丽	中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室	3	21	3.0	3.0