党参DNA-AFLP分析体系建立及条件优化

• 作者: 杨静 王哲 苏强 高建平
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 党参 扩增片段长度多态性 CTAB法
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 326-330
• 页数: 5页
• 分类号: Q81
• 语种: 中文

摘要

探讨影响党参(Codonopsis pilosula)扩增片断长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP)的各种因素,建立并优化党参AFLP反应体系.以党参鲜嫩叶片为材料,采用改进的CTAB法提取基因组DNA,考察适合的酶切反应时间、对连接产物和预扩产物设置不同稀释倍数进行扩增,最后聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,银染检测.本研究建立了适用于党参的AFLP系:300 ng的基因组DNA被限制性内切酶Mse J和EcoR J完全酶切,酶切条件为37℃3 h,连接条件为16℃12 h;连接产物1倍,预扩产物150倍稀释.扩增后,2对E+3/M+3引物组合共得到90条多态性条带,PAGE电泳条带清晰,稳定,分辨率高.本研究建立的反应体系适用于党参的DNA-AFLP分析研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨静		192	954	13.0	22.0
2	苏强		14	84	5.0	9.0
3	高建平		50	501	11.0	22.0
4	王哲		12	30	4.0	4.0