克隆与表达产甲酸草酸杆菌代谢基因Frc及临床意义

• 作者: 何朝晖 何永忠 吴文起 曾国华 李逊 袁坚 赖德辉 雷鸣
• 来源期刊: 中华腔镜泌尿外科杂志（电子版）
• 学科: 医学
• 关键词: 产甲酸草酸杆菌 Frc 基因克隆 大肠杆菌BL-21
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 239-244
• 分类号: R6
• 字数: 4541字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cma.j.issn.1674-3253.2010.03.018

摘要

目的 研究产甲酸草酸杆菌草酸代谢基因Frc转化大肠杆菌BL21后稳定表达代谢草酸相关性酶--甲酰辅酶A转移酶(FCoAT)对草酸的降解效能.方法 成功培养产甲酸草酸杆菌后,采用PCR方法从产甲酸草酸基因组中获得Frc基因,克隆到pMDTM19-T载体上进行测序,得到正确的基因片段.经双酶切将目的 基因片段插入到原核表达载体PGEX-4T-2上,测序正确后,转化大肠杆菌BL-21,IPTG诱导表达GST-FCoAT融合蛋白,表达产物行western-blot鉴定分析.结果 重组克隆载体pMDTM19-Frc经测序鉴定序列正确.成功构建融合原核表达质粒PGEX-4T-2-Frc,大肠杆菌BL21成为载体,并稳定表达可溶性融合蛋白GST-FCoAT的同时获得代谢草酸潜能.结论 克隆产甲酸草酸杆菌Frc基因,成功构建PGEX-4T-2-Frc载体,并转化大肠杆菌BL21,能稳定表达可溶性融合蛋白GST-FCoAT,具有代谢草酸潜能,为肠道细菌获得代谢草酸潜能,减少胃肠道内草酸的吸收,降低尿液中草酸含量和临床防治草酸结石的研究奠定理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何永忠	广州医学院港湾医院泌尿外科	46	545	12.0	22.0
2	李逊	广州医学院港湾医院泌尿外科	133	3293	27.0	54.0
3	曾国华	广州医学院第一附属医院泌尿外科	109	2110	19.0	44.0
4	雷鸣	广州医学院第一附属医院泌尿外科	31	115	5.0	8.0
5	袁坚	广州医学院第一附属医院泌尿外科	74	1564	16.0	38.0
6	何朝晖	广州医学院第一附属医院泌尿外科	12	41	4.0	5.0
7	赖德辉	广州医学院港湾医院泌尿外科	11	113	4.0	10.0
8	吴文起	广州医学院第一附属医院泌尿外科	31	160	6.0	11.0