对粉纹夜蛾高毒力cry9Eα基因的克隆及表达

• 作者: 刘廷辉 孙伟明 孙永祥 王立光 郭巍
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 苏云金杆菌 cry9Eα7基因 基因克隆 基因表达 杀虫活性
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 601-605
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

[目的]从本实验室分离的Bt4菌株中克隆cry9Eα基因,并研究其表达和杀虫活性.[方法]以PCR-RFLP方法鉴定Bt4菌株含有cry9基因,然后以菌株Bt4的质粒为模板,利用全长引物F9EA/R9EA进行PCR扩增全长基因.[结果]将目的片段插入到表达载体pET21b,得到大肠杆菌重组表达质粒pETcrygEa.转化E.coli BL21(DE3),诱导后表达130 kDa的蛋白,再将cry9Eα7基因连接到穿梭载体pSXY422b,电激转化HD73-(cry-),得到工程菌BioHD9Ea7,提取Cry9Ea7晶体蛋白,并进行生物活性测定.生物活性测定结果显示CrygEa7蛋白对粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)初孵幼虫具有高毒力,LC_(50)为0.044 μg/mL,而对甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)和棉铃虫(Helicoverpa armigera)初孵幼虫未显示活性.[结论]克隆和表达了一个对粉纹夜蛾高毒力的基因cry9Eα7,并成功构建了工程菌BioHD9Ea7.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭巍	河北农业大学生命科学学院	30	143	7.0	10.0
5	刘廷辉	河北农业大学植物保护学院河北省农作物病虫害生物防治工程技术中心	29	97	6.0	7.0
6	孙永祥	河北农业大学生命科学学院	2	14	2.0	2.0
7	孙伟明	河北农业大学生命科学学院	4	31	3.0	4.0
8	王立光	河北农业大学植物保护学院河北省农作物病虫害生物防治工程技术中心	1	10	1.0	1.0