葡萄卷叶伴随病毒-3外壳蛋白的原核表达及其特异性抗血清的制备

• 作者: 刘亚萍 徐章逸 洪霓 王国平 王彩霞
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: GLRaV-3 cp 基因克隆 原核表达 PAS-ELISA DBIA
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 细胞生物学、生理学、生物化学、分子生物学
• 页码范围: 129-134
• 分类号: S432.41
• 字数: 4327字
• 语种: 中文

摘要

利用RT-PCR技术扩增得到了葡萄卷叶伴随病毒-3(Grapevine leafroll associated virus-3,GLRaV-3)中国分离物的外壳蛋白(coat protein,cp)基因.序列分析结果表明,cp基因的长度为942 bp,与已报道的其它GLRaV-3分离物的cp核苷酸相似性为91%～99%,编码的氨基酸相似性为95%～100%.将此基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS后用终浓度为1 mmol/L的IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE及Western blotting分析表明,cp在大肠杆菌中可表达出分子量约为35 kDa的蛋白.纯化表达产物后免疫家兔制备抗血清.A蛋白酶联免疫吸附测定(PAS-ELISA)及斑点免疫结合测定(DBIA)结果显示,制备的特异抗血清可用于检测田间感病葡萄样品中的GLRaV-3.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王国平		61	723	16.0	25.0
3	洪霓		53	460	12.0	19.0
9	徐章逸		1	10	1.0	1.0
10	刘亚萍		1	10	1.0	1.0
11	王彩霞		1	10	1.0	1.0