番茄红素β环化酶基因(Lyc-β)RNAi载体构建及表达鉴定

• 作者: 何娟 吴志苹 郝青南 马兵钢 马超 鲁晓燕
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 番茄 类胡萝卜素 番茄红素 番茄红素β环化酶基因 RNAi
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 10-17
• 页数: 8页
• 字数: 6294字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.01.003

摘要

从番茄(Lycopersicun esculentum Mill)提取总RNA,根据GenBank中番茄红素β环化酶基因(Lye-β)序列(X86452),经mRNA反转录扩增出2段Lyc-β基因高度保守的300 bp DNA 片段,从β-葡萄糖苷酶基因(gusA)中扩增出170 bp的内含子片段.分别将两段不同的Lyc-β片段的正、反向序列与内含子连接,构建出两套干扰Lyc-β基因的植物表达载体.经根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciems)介导转化番茄,22 株转基因植株通过荧光定量PCR分析干扰效果,结果显示,2套干扰载体的干扰效率表现出一定的差异,Lyc-β基因mRNA平均含量分别为对照的11.78%和13.86%,进一步用HPLC分析转化株的番茄红素含量,结果表明,转基因植株中番茄红素的含量最高可达13.84 μg/g FW,是对照的4.26倍.