构建番茄红素β/ε环化酶基因RNAi植物表达载体及其表达分析

• 作者: 何娟 王蕾 郝青南 马兵钢 马超 鲁晓燕
• 来源期刊: 核农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 番茄红素 β-胡萝卜素 叶黄素 番茄红素β/ε环化酶 RNAi
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 482-489
• 分类号: S6
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中Lyc-β基因(X86452)及Lyc-ε基因(Y14387)设计引物,通过高保真PCR从番茄cDNA中克隆到两段长度为302和330bp的Lyc-β基因片段和两段长度为302和288bp的Lyc-ε基因片段.从质粒pCAMBIA-2301(AF234316)克隆出gusA基因长度为168和235bp的2个内含子片段.根据RNAi原理将正、反向序列与内含子连接,之后插入启动子与终止子之间构建成4组植物表达载体.利用农杆菌介导的叶盘法转化烟草植株,通过PCR鉴定共获得107株转基因植株.利用荧光定量PCR分析干扰效果,结果显示经4组干扰载体干扰后,转基因植株中目的基因mRNA含量分剐为对照的3.4% 、16.4% 、15.2% 和21.8% .进一步用HPLC对应分析转化株的番茄红素含量,结果表明转基因植株中番茄红素平均增长量分别为3.4、2.1、3.4和2.0μg/g.同时测定转基因植株中的β-胡萝卜紊与叶黄素含量,发现它们根据干扰的基因不同呈现对应的变化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王蕾	石河子大学农学院	64	374	11.0	17.0
2	马超	石河子大学农学院	11	88	6.0	9.0
3	郝青南	石河子大学农学院	7	67	5.0	7.0
4	马兵钢	石河子大学农学院	37	490	14.0	20.0
5	鲁晓燕	石河子大学农学院	35	265	10.0	14.0
6	何娟	石河子大学农学院	5	53	3.0	5.0