慢病毒载体介导的脂肪细胞SOCS-3 RNA干扰及对瘦素反应的研究

• 作者: 于飞 任亚浩 刘亚莉 刘莉 安丽 杨军 赵越 马爽
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 细胞因子信号转导抑制因子-3 RNA干扰 慢病毒载体 瘦素 脂肪细胞
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 377-380
• 分类号: Q291
• 字数: 3346字
• 语种: 中文

摘要

体内存在瘦素抵抗是大多数肥胖者的共同特征,但如何缓解瘦素抵抗目前还无有效方法.通过应用慢病毒载体介导的RNA干扰技术对大鼠脂肪细胞中瘦素信号转导通路的负反馈抑制因子-细胞因子信号转导抑制因子-3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS-3)基因进行敲减,观察其对大鼠重组瘦素作用的反应.研究发现.阴性对照慢病毒和SOCS-3 shRNA慢病毒对成熟脂肪细胞的感染率约为80%.利用real-time PCR和Western blot法检测发现SOCS-3 shRNA慢病毒通过在成熟脂肪细胞内表达shRNA而造成SOCS-3基因在mRNA和蛋白水平的敲减,有效率分别为72%和57%;经50 nmol/L瘦素处理6 h后,感染阴性对照病毒的脂肪细胞SOCS-3 mRNA表达有明显升高(P<0.05),而感染SOCS-3 shRNA慢病毒的脂肪细胞SOCS-3 mRNA表达则无明显变化(P>0.05).结果表明,利用SOCS-3 shRNA慢病毒去敲减脂肪细胞中SOCS-3的表达可能对于解除肥胖者外周瘦素抵抗具有一定的作用.