小鼠H-2Db-BSP融合基因的构建与表达

• 作者: 李佳楠 董元火
• 来源期刊: 江汉大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 克隆 H-2Db 生物素化序列
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 95-97,101
• 分类号: R392.11
• 字数: 2353字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0143.2010.03.026

摘要

目的:构建小鼠H-2D～b-BSP融合基因,并诱导其在大肠杆菌中表达.方法:采用RT-PCR方法从C57BL/6小鼠淋巴细胞中扩增出H-2D～bα链的胞外段基因,经双酶切置换已构建的HLA-A*0201-BSP重组体中的HLA-A*0201胞外段序列,使H-2Db与BirA酶底物肽(BSP)序列融合,构建H-2D～b-BSP融合基因表达载体,转化大肠杆菌BL21(λDE3)菌株,筛选重组子,并经IPTG诱导融合蛋白表达.结果:构建的H-2D～b-BSP融合基因插入正确且序列与GenBank一致;经1 mmol/L浓度的IPTG诱导后4b蛋白表达达到高峰,且融合蛋白以包涵体形式存在.结论:成功构建H-2～b-BSP融合基因,并诱导其在大肠杆菌得以表达,为进一步构建H-2D～b四聚体,研究T细胞应答提供了物质基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董元火	江汉大学生命科学学院生物技术系	34	149	8.0	10.0
2	李佳楠	江汉大学生命科学学院生物技术系	27	90	5.0	8.0