猪γ干扰素基因的克隆表达及其抗原性的初步研究

• 作者: 余为一 刘雪兰 张敬梅 李林
• 来源期刊: 安徽农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪γ干扰素 克隆 原核表达 抗原性
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 动物科学与动物医学
• 页码范围: 32-35
• 页数: 4页
• 分类号: S852.4
• 语种: 中文

摘要

为研究猪γ干扰素(poIFN-γ)的生物学活性及其在机体免疫应答中的作用机理,克隆并表达了猪IFN-γ基因.首先应用RT-PCR方法通过一对自行设计的引物从猪脾脏淋巴细胞中扩增了猪γ干扰素基因片段,分别将其定向插入原核表达载体pGEX-4T-1和pET-32a中,经测序表明与已报道的核苷酸序列同源性为100%.接着将重组质粒pGEX-poIFN-γ和pET-poIFN-γ分别转化大肠杆菌BL21株,经IPTG诱导,得到高效表达.所表达的融合蛋白均以不溶性的包涵体形式存在,分子量分别为43.0和35.0 ku,与理论推算值相符.为研究IFN-γ在表达中结构的变化,采用上述2种融合蛋白分别作为免疫抗原和检测抗原.结果用GST-poIFN-γ免疫小鼠所诱导的抗体可与poIFN-γ产生特异性结合,表明不同原核质粒表达的猪IFN-γ仍保持其特有的结构.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余为一	安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室	121	1025	17.0	25.0
2	张敬梅	安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室	2	3	1.0	1.0
3	刘雪兰	安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室	35	167	7.0	12.0
4	李林	安徽农业大学安徽省人兽共患病重点实验室	6	21	3.0	4.0