正交设计优化崇明白山羊SSR-PCR反应体系

• 作者: 刘志学 张小平 成建忠 罗倩倩 陈士超 黄松明
• 来源期刊: 中国畜牧杂志
• 学科: 农学
• 关键词: SSR-PCR 正交设计 体系优化 山羊
• 年，卷（期）: 2010,（15）
• 页码范围: 12-15
• 分类号: S827.2
• 字数: 3113字
• 语种: 中文

摘要

以崇明白山羊基因组DNA为模板,利用正交试验设计L16(45),对影响崇明白山羊SSK-PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP及引物的浓度)进行优化.结合单因素完全随机试验筛选各因素的最佳水平,针对MCB3224引物建立了崇明白山羊SSK-PCR的最佳反应体系.结果表明:在20 μL的反应体系中,5个因素的最佳水平分别为TaqDNA聚合酶0.5 U、Mg2+2.5 mmol/L、模板DNA 30 ng、dNTP 0.20 mmol/L,引物0.8 mol/L;引物的最佳退火温度为57.3℃.利用16份崇明白山羊的DNA模板和2个微卫星引物验证此反应体系,聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果显示该体系稳定可靠且普适性较好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张小平	安徽师范大学生命科学学院	161	2027	23.0	33.0
2	成建忠		29	111	7.0	9.0
3	刘志学	同济大学生命科学与技术学院	25	186	7.0	12.0
4	陈士超	同济大学生命科学与技术学院	12	94	4.0	9.0
5	罗倩倩	安徽师范大学生命科学学院	2	4	1.0	2.0
6	黄松明		13	40	4.0	6.0