PEX慢病毒载体构建及其在293FT细胞中的分泌表达

• 作者: 唐红卫 张韶峰 李锦毅 王字玲 赵中松 赵敬湘
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: PEX基因 信号肽 慢病毒载体 293FT细胞
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 488-492
• 分类号: R34|Q782
• 字数: 3993字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2010.06.004

摘要

目的 构建含人MMP-9信号肽-MMP-2-PEX片段的重组慢病毒,并在293FT细胞中分泌表达PEX蛋白.方法 利用RT-PCR、基因重组等技术,构建含MMP-9信号肽-MMP-2-PEX片段的重组慢病毒表达载体pBPLV-signal-PEX,在脂质体介导下与包装质粒(pLP1、pLP2)、包膜质粒(pLP/VSVG)共转染293FT细胞,包装产生慢病毒并进行滴度测定.慢病毒感染2931;3"细胞后,Western印迹法检测293FI"细胞培养上清中PEX的表达.结果 酶切和DNA测序表明慢病毒表达载pBPLV-signal-PEX构建正确,四质粒共转染293FT细胞成功获得慢病毒;慢病毒感染293FT细胞后,在细胞培养卜清中可检测到PEX蛋白的表达.结论 成功构建了含人PEX的重组慢病毒,在体外有效感染293fT细胞并持续分泌表达目的 蛋白,为进一步研究PEX在肿瘤侵袭与转移中的作用提供实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张韶峰	武警总医院临床教研室	32	135	7.0	10.0
2	王字玲	军事医学科学院野战输血研究所	47	218	8.0	11.0
3	唐红卫	武警总医院临床教研室	21	88	5.0	8.0
4	李锦毅	武警总医院临床教研室	14	70	4.0	8.0
5	赵敬湘	军事医学科学院野战输血研究所	23	79	5.0	7.0
6	赵中松	辽宁医学院研究生学院	1	1	1.0	1.0