hrCEMP1真核表达载体的构建及其在成纤维细胞株中的表达

• 作者: 刘玉 孙卫斌
• 来源期刊: 口腔医学研究
• 学科: 医学
• 关键词: 牙骨质蛋白 真核表达载体 NIH3T3 细胞株
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 809-812
• 分类号: R781.4
• 字数: 3160字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建含hrCEMP-1基因真核表达质粒.方法:采用PCR方法扩增hrCEMP1基因,并在两端添加合适的酶切位点;利用定向克隆技术将hrCEMP1基因插入到载体pcDNA3.1中,重组的pcDNA3.1-CEMP1在大肠杆菌DH5α内扩增后,通过酶切电泳鉴定和DNA测序证明质粒构建成功;利用高效率的阳离子聚合物,将经过鉴定的pcDNA3.1-CEMP1转染入NIH3T3细胞中,并以RT-PCR检测hrCEMP1基因的转录.结果:通过对重组质粒pcDNA3.1-CEMP1进行酶切鉴定以及DNA序列测定分析,证明真核表达重组质粒pcDNA3.1-CEMP1构建成功,开放阅读框架正确;转染细胞株的RT-PCR结果中观察到特异性242 bp片段.结论:成功构建含hrCEMP-1基因真核表达质粒pcDNA3.1-CEMP1,并可在NIH3T3细胞株中mRNA水平表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘玉	南京大学口腔医学院牙周病科	20	225	6.0	14.0
2	孙卫斌	南京大学口腔医学院牙周病科	45	160	6.0	10.0