磁珠富集法筛选实验豚鼠微卫星分子标记

• 作者: 屠珏 应华忠 徐剑钦 朱亮 蔡月琴 陈民利
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 豚鼠 磁珠富集法 微卫星
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 29-34
• 分类号: R394
• 字数: 4205字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2010.06.007

摘要

目的 直接从实验豚鼠基因组DNA中筛选获得微卫星分子标记.方法 应用磁珠和生物素标记的微卫星探针与豚鼠基因组酶切片段杂交,捕获200 ～ 1000 bp含有微卫星序列的DNA片段,连接到pMD-18V载体中,转化到感受态细胞E. coli DH5α中构建富集微卫星序列的小片段插入文库.然后用PCR法进行筛选.结果 从约2000个转化子中获得240个阳性克隆.对其中98个进行了测序,并成功设计豚鼠微卫星引物17对.结论 经过优化的磁珠富集法能够稳定、高效地获得豚鼠微卫星标记.本研究获得的微卫星位点将成为豚鼠遗传学研究的有力工具.