共表达鸡IBDV VP2和IL-2基因的重组毕赤酵母的构建及免疫原性

• 作者: 丁轲 余祖华 刘一尘 张春杰 王臣 程相朝
• 来源期刊: 河南科技大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 重叠延伸PCR 鸡IL-2 IBDV VP2 融合表达 毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 农业与生物科学
• 页码范围: 74-78
• 分类号: S852.659.6|Q786
• 字数: 3322字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-6871.2010.03.020

摘要

通过重叠延伸PCR扩增IL2-VP2串联基因,克隆到pMD18-T载体上,亚克隆正向插入到毕赤酵母表达质粒pPICZαA中,经PCR和双酶切鉴定表明成功构建了酵母重组表达载体 pPICZαA-IL2-VP2.将该重组质粒线性化后电击转化入感受态毕赤酵母X-33菌株,构建成分泌型表达IL2-VP2的酵母工程菌株.经甲醇诱导后,通过SDS-PAGE、Western-blot活性检测分析表明IL2-VP2基因长度为1.85 kb,包含缺失了TAA终止密码子的IL-2基因和缺失了ATG起始密码子的VP2基因,两个基因之间以高度柔韧性的(Gly-Gly-Gly-Ser)编码核苷酸相连接,并在该体系中得到分泌表达,分子量约为50 kD,且表达产物对传染性法囊病毒具有较好的反应原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程相朝	河南科技大学动物科技学院	144	685	15.0	20.0
2	余祖华	河南科技大学动物科技学院	43	163	7.0	11.0
3	丁轲	河南科技大学动物科技学院	69	214	7.0	11.0
4	张春杰	河南科技大学动物科技学院	127	593	13.0	19.0
5	王臣	河南科技大学动物科技学院	45	95	5.0	8.0
6	刘一尘	河南科技大学动物科技学院	38	86	5.0	8.0