EZH2 shRNA真核表达载体的构建及其在卵巢癌A2780细胞系的稳定表达

• 作者: 于利利 吴莉英 李智敏 王泽华 胡沙 韩方 黄在菊
• 来源期刊: 华中科技大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: EZH2 卵巢癌 RNA干扰 载体构建
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 632-634,666
• 分类号: R737.31
• 字数: 2455字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2010.05.011

摘要

目的 采用基因工程技术,构建EZH2 shRNA的真核表达载体,获得稳定表达干扰质粒的卵巢癌A2780细胞系.方法 合成特异性干扰EZH2的shRNA片段并定向克隆插入Supersilencing shRNA质粒表达载体pGPU6/GFP/Neo,获得表达载体pGPU6/GFP/Neo-shEZH2.脂质体介导重组质粒转染A2780细胞,经G418加压筛选获得稳定转染细胞株,Real time RT-PCR和Western blot检测转染后细胞系EZH2的表达.结果 测序结果证实重组载体构建成功,稳定转染shEZH2的A2780细胞EZH2的mRNA和蛋白水平下降(90.20±1.66)%和(73.80±5.49)%,P＜0.01,差异有统计学意义. 结论成功构建EZH2 shRNA表达载体,获得EZH2基因稳定沉默的A2780细胞系,为进一步研究以EZH2为靶点的卵巢癌治疗奠定实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王泽华	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	260	1294	18.0	23.0
2	李智敏	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	12	48	4.0	6.0
3	黄在菊	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	13	65	5.0	8.0
4	胡沙	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	25	142	8.0	10.0
5	于利利	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	28	158	8.0	11.0
6	吴莉英	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	5	11	2.0	3.0
7	韩方	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	8	15	3.0	3.0