白喉毒素DAB389-αMSH重组毒素的构建及表达

• 作者: 刘文涛 张国利 李昌昊 李泽鸿
• 来源期刊: 中国兽药杂志
• 学科: 农学
• 关键词: DAB389-αMSH 重组毒素 构建 表达
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 7-9,37
• 分类号: S852.44
• 字数: 2598字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-1280.2010.09.003

摘要

利用含有白喉毒素N端序列的基因作上游引物、含有αMSH全序列作下游引物,以pET28a/DAB389-EGF为模板,PCR扩增DAB389-αMSH基因片段,用限制性内切酶EcoR I和Nco I酶切,并插入原核表达载体pET28a的相应位点,构建了重组表达载体pET28a/DAB389-αMSH,在大肠杆菌中表达重组融合蛋白DAB389-αMSH,转化菌经1 mmol/L IPTG、30℃诱导5 h,用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达的重组毒素.结果表明扩增的片段与理论值一致,重组质粒的DNA序列分析正确;SDS-PAGE表明重组毒素相对分子量为43.76 KD,且表达量达菌体总蛋白量的31.6%.Western blot分析显示,重组毒素能特异性地与抗白喉抗体结合,表明已成功构建表达了重组DAB389-αMSH的工程菌株,并获得表达蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张国利	军事医学科学院军事兽医研究所	29	67	4.0	6.0
2	李泽鸿	吉林农业大学生命科学学院	65	401	12.0	17.0
6	刘文涛	吉林农业大学生命科学学院	5	12	2.0	3.0
7	李昌昊	吉林农业大学生命科学学院	1	2	1.0	1.0