低浓度胶原酶差速消化法分离纯化小鼠Leydig细胞的研究

• 作者: 刘国华 孙杰 朱英坚 钟量 陈凡凡
• 来源期刊: 中华小儿外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 莱迪希细胞 细胞分离
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 694-697
• 分类号: R3
• 字数: 3979字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2010.09.012

摘要

目的 建立简单快速获得Leydig细胞的分离纯化新方法.方法 分阶段应用低浓度胶原酶,采用差速消化法分离纯化小鼠睾丸内的Leydig细胞.将不同阶段获得的细胞分别培养,观察其原代生长情况.采用免疫荧光染色,观察培养的Leydig细胞内的标志性酶--3β羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)、胆固醇侧链裂解酶(CYP11A1)和17α羟化酶(CYP17A1)的表达情况.结果 使用低浓度胶原酶短时间重复三次消化,以第二次消化获得的Leydig细胞纯度最高69.6%±4.16%,增殖能力最强.培养7 d后纯度增高至90%.原代培养的各个阶段均可检测到睾酮合成酶谱的表达.结论 应用低浓度胶原酶差速消化法可以获得大量高活力的Leydig细胞,原代培养效果理想,细胞功能保存完好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙杰		7	14	3.0	3.0
2	钟量	上海市第一人民医院泌尿外科	1	3	1.0	1.0
3	陈凡凡		2	8	2.0	2.0
4	朱英坚	上海市第一人民医院泌尿外科	1	3	1.0	1.0
5	刘国华	上海市第一人民医院泌尿外科	2	13	2.0	2.0