小鼠B7-H3-Fc融合蛋白的表达及其生物学活性的研究

• 作者: 严茹红 傅丰庆 孙静 张光波 张学光
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: B7-H3 融合蛋白 小鼠 T细胞 协同刺激分子
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 1067-1069,1074
• 分类号: R392.12
• 字数: 3890字
• 语种: 中文

摘要

目的:制备B7-H3-Fc融合蛋白,研究其对T细胞的共刺激作用.方法:首先采用PCR技术分别从pMD19-T/小鼠B7-H3和pMD19-T/hIgG1(Fc)重组载体中扩增出小鼠B7-H3胞外段基因和人IgG1重链Fc恒定区基因.通过重叠PER技术将2段基因连接成B7-H3-Fc,经EcoR I和Bgl Ⅱ双酶切后插入真核表达载体plRES2-EGFP构建成pIRES2-EG-FWB7-H3-Fc重组载体.脂质体法转染CHO细胞,经G418加压筛选能稳定分泌表达小鼠B7-H3-Fc融合蛋白的基因转染细胞,并经Western blot鉴定.该转基因细胞无血清培养后,收集细胞上清、超滤浓缩后行经Protein G柱纯化,获得纯品B7-H3-Fc融合蛋白.通过CCK-8以及ELISA方法检测小鼠B7-H3-Fc融合蛋白对T细胞体外增殖及细胞因子分泌的影响.结果:成功地构建了能稳定表达B7-H3-Fc融合蛋白基因的CHO转基因细胞株,该融合蛋白能够剂量依赖性地促进T细胞体外增殖及IL-2和IFN-γ等细胞因子分泌.结论:本研究提示B7-H3作为重要的共刺激分子,在调节T细胞免疫应答中发挥了正性共刺激作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张学光	苏州大学医学生物技术研究所	399	1957	18.0	24.0
2	张光波	苏州大学医学生物技术研究所	71	276	9.0	11.0
3	孙静	苏州大学医学生物技术研究所	47	238	10.0	13.0
4	严茹红	苏州大学医学生物技术研究所	19	115	6.0	10.0
8	傅丰庆	苏州大学医学生物技术研究所	13	26	3.0	4.0