APOBEC3G真核表达载体构建及抗HBV复制的初步研究

• 作者: 史震 孔凡运 尤红娟 汤仁仙 甘宜敏 胡丽娜 郑葵阳
• 来源期刊: 苏州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3G 真核表达载体 乙型肝炎病毒 HepG2.2.15细胞
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 方法与技术
• 页码范围: 1210-1213,1235
• 分类号: R373.2+1
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3G(APOBEC3G)真核表达载体,并探讨其抗乙型肝炎病毒(HBV)复制的作用.方法 采用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞中克隆APOBEC3G基因编码区片段,构建pcDNA3.1-A3G真核表达载体,利用脂质体转染法将pcDNA3.1-A3G转染HepG2.2.15细胞,分别于转染后第24、48、72 h收集细胞培养上清液和细胞总蛋白,Western blot检测HBx蛋白表达情况,ELISA法检测细胞上清液中HBsAg和HBeAg表达情况.结果 测序结果显示pcDNA3.1-A3G真核表达载体中APOBEC3G编码区序列存在1处碱基同义突变;HepG2.2.15细胞经APOBEC3G蛋白干扰后,HBx、HBsAg和HBeAg表达量逐渐降低,于72h表达量显著降低.结论 成功构建了APOBEC3G真核表达载体pcDNA3.1-A3G;APOBEC3G在体外可以抑制HBV复制,为深入研究APOBEC3G作为抗HBV药物提供了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汤仁仙	徐州医学院病原生物与免疫学教研室	74	220	8.0	11.0
2	尤红娟	徐州医学院病原生物与免疫学教研室	32	99	6.0	7.0
3	史震	徐州医学院病原生物与免疫学教研室	14	33	3.0	5.0
4	甘宜敏	徐州医学院病原生物与免疫学教研室	5	3	1.0	1.0
5	孔凡运	徐州医学院病原生物与免疫学教研室	5	6	2.0	2.0
6	胡丽娜	徐州医学院病原生物与免疫学教研室	2	4	2.0	2.0