HBV HBx基因荧光真核表达质粒的构建及其运用于HBV复制机制的初步研究

• 作者: 吴园园 孙蓓蓓 杨凯 潘颖 王爱华 管世鹤
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 HBx蛋白 质粒 复制
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1297-1299
• 页数: 3页
• 分类号: R373.2|R512.6|Q343.3
• 字数: 2441字
• 语种: 中文

摘要

目的构建能够表达HBx蛋白的绿色增强荧光蛋白-HBx(pEGFP-N1-HBx)真核表达质粒,并探讨HBx蛋白对乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响。方法以HBV Dimer为模板,PCR法扩增HBx基因,PCR产物测序分析正确后克隆至真核表达载体pEGFP-N1,命名为pEGFP-N1-HBx。将该质粒转染肝胚瘤细胞株HepG2,以RT-PCR法及荧光显微镜观察其表达情况,再通过基因共转染等技术研究 HBx 蛋白对HBV复制的影响。结果酶切鉴定和序列分析证实构建质粒含HBx基因,RT-PCR法检测和荧光显微镜观察表明构建的pEGFP-N1-HBx 质粒在 HepG2细胞中能够表达；质粒pEGFP-N1-HBx与pHBV48-X0共转染后,HepG2细胞上清液HBV-DNA、HBsAg和HBeAg分泌显著增多。结论HBx基因克隆及其真核表达载体pEGFP-N1-HBx构建成功；HBx蛋白能够促进HBV复制及抗原分泌。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	管世鹤	安徽医科大学第二附属医院检验科	84	383	10.0	14.0
2	杨凯	安徽医科大学第二附属医院检验科	62	266	9.0	11.0
3	潘颖	安徽医科大学第二附属医院检验科	21	93	5.0	8.0
4	王爱华	安徽医科大学第二附属医院检验科	13	52	4.0	6.0
5	吴园园	安徽医科大学第二附属医院检验科	11	55	4.0	7.0
6	孙蓓蓓	安徽医科大学第二附属医院检验科	10	57	4.0	7.0