多头带绦虫Tm16基因的克隆表达与免疫原性分析

• 作者: 古小彬 安晓雪 杨光友 杨应东 牟静 王淑贤 王颖旺 边尧
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 多头带绦虫 Tm16基因 克隆 表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 934-939
• 页数: 6页
• 分类号: S852.734
• 语种: 中文

摘要

为分析多头带绦虫Tm16重组蛋白的免疫原性,利用RT-PCR技术从激活的多头带绦虫六钩蚴中扩增Tm16基因,将扩增产物亚克隆入pET32a(+)载体中,构建pET32a-Tm16表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达融合蛋白;表达产物进行SDS-PAGE和western-blot分析后,将纯化的Tm16重组蛋白免疫小鼠,用ELISA检测其血清抗体.结果显示,多头带绦虫Tm16基因序列长569 bp,包括1个399 bp的开放阅读框,与已报道的Tm16基因(序列号:EF672036)的序列同源性为99.8%.表达的重组蛋白大小约为30.69 ku,与脑多头蚴病羊血清的免疫印迹分析呈阳性反应;小鼠免疫1周后血清中即可检测到抗Tm16蛋白的特异性抗体,并于免疫后第5周达到高峰.结果表明Tm16重组蛋白具有较好的免疫原性,可作为脑多头蚴病疫苗的候选抗原.