薇甘菊几丁质酶基因的原核表达及活性分析

• 作者: 彭少麟 李冬梅
• 来源期刊: 西北植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 薇甘菊 几丁质酶基因 融合蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 894-900
• 分类号: Q786
• 字数: 5053字
• 语种: 中文

摘要

将薇甘菊Mmchi1基因cDNA序列的编码区插入到原核表达载体pET-32a(+)中,构建融合表达质粒,并在大肠杆菌中进行了融合蛋白6×His-Mmchi1的诱导表达、Western blot和酶活性分析.结果表明,0.1 mmol/L IPTG、25℃诱导4 h,在大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)中能获得可溶性的6×His-Mmchi1;Western blot证实表达的6×His-Mmchi1能与抗6×His的单抗发生特异性反应,分子量约为55 kD,与预测的融合蛋白分子量相符;纯化后的6×His-Mmchi1最佳酶活性pH和温度分别为5.5～6.5和35～40℃.为进一步研究融合蛋白6×His-Mmchi1的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭少麟		2	12	1.0	2.0
2	李冬梅	广东省农业科学院花卉研究所	14	166	6.0	12.0