新孢子虫核糖体磷蛋白基因真核表达载体的构建及瞬时表达

• 作者: 张吉浩 杜秋明 许应天 贾文影 高建伟 鲁承
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 新孢子虫核糖体磷蛋白(NcPO) Vero细胞 真核表达
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 30-33
• 分类号: S852.72
• 字数: 3013字
• 语种: 中文

摘要

采用PCR技术扩增出新孢子虫核糖体磷蛋白(NcPO)全长基因片段,并将其克隆入真核表达载体pVAX1中,构建pVAX1一NcPO表达载体.用脂质体法将阳性克隆瞬时转染Vero细胞,对转染细胞进行RT-PCR检测和IFA检测目的基因的转录与表达情况.结果表明克隆的PO蛋白基因序列全长为1 379 bp;RT-PCR结果显示目的基因已被成功转录;IFA检测证明目的基因被成功表达.本试验成功构建了NcPO的真核表达载体,转染Vero细胞,获得了NcPO的瞬时表达.