猪圆环病毒2型ORF2基因的原核表达及其免疫原性检测

• 作者: 周贺娟 李兆学 李玉林 梁晓艳 王云龙 王继美 贾丽锋
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒 ORF2 原核表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 63-67
• 分类号: S852.659.2|S858.28
• 字数: 3169字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2010.09.015

摘要

以病猪脾脏组织为材料,提取总RNA,通过RT-PCR得到579 bp的猪圆环病毒2型(PCV-2)/ORF2片段,与原核表达载体pET32a重组,通过菌落PCR鉴定、双酶切鉴定及测序鉴定后,证实重组质粒pET32a/ORF2构建成功,将其转化入表达菌Balgold,通过IPTG诱导表达,利用Ni-NTA亲和层析纯化目的产物,Western blot验证其免疫原性,重组蛋白免疫Balb/c小鼠,检测小鼠体内中和抗体滴度.获得的重组蛋白包涵体的形式出现,表达量占菌体总蛋白的30%,变性纯化后纯度达90%以上,Western blot证实重组蛋白能与PCV-2阳性血清发生反应,免疫Balb/c小鼠45 d后中和抗体滴度达到1∶22.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王云龙		47	252	9.0	13.0
3	李玉林		35	123	7.0	9.0
4	王继美		2	5	2.0	2.0
5	李兆学		3	6	2.0	2.0
6	梁晓艳		3	5	2.0	2.0
9	贾丽锋		2	4	2.0	2.0
10	周贺娟		3	20	2.0	3.0