H5N1禽流感病毒NA基因重组腺病毒表达载体的构建

• 作者: 宋涛 徐彦召 朱国坡 李任峰 王青 胡建和
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 腺病毒载体 AIV H5N1亚型 NA基因 载体构建
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 15-19
• 分类号: S852.659.5|Q782
• 字数: 3386字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2010.06.004

摘要

构建携带有H5Nl亚型AIV NA基因的重组腺病毒表达载体,为进一步研究AIV中NA基因在病毒致病过程中的作用及相关诊断试剂的开发提供依据.采用PCR的方法从构建好的包含有H5N1AIV NA基因的pMD-19T-N1质粒中扩增出NA基因,定向插入pAdtrack-CMV腺病毒穿梭质粒中,含有目的基因的腺病毒穿梭质粒pAdtrack-N1与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在基因工程菌BJ5183中进行同源重组,获得腺病毒质粒pAdeasy-N1,将pAdeasyal-N1经pac Ⅰ线性化后转染HEK293细胞株,包装出含有NA基因的腺病毒pAd-N1.结果表明,构建含有目的基因的腺病毒穿梭质粒pAdtrack-N1和含有目的基因的腺病毒质粒pAdeasy-N1经PCR、双酶切及核苷酸测序测定无误.线性化后的pAdeasy-N1转染HEK293细胞,成功获得腺病毒pAd-N1载体,经绿色荧光蛋白和RT-PCR分析证实,目的基因在该细胞中成功表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡建和	河南科技学院动物科学学院	140	452	10.0	15.0
2	李任峰	河南科技学院动物科学学院	61	206	7.0	12.0
3	朱国坡	河南科技学院动物科学学院	8	17	1.0	4.0
4	王青	河南科技学院动物科学学院	69	227	10.0	11.0
5	宋涛	河南科技学院动物科学学院	4	2	1.0	1.0
6	徐彦召	中国农业科学院上海兽医研究所	11	28	2.0	5.0