EV71TaqMan PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 于贺娟 卫海燕 李幸乐 杜燕华 许汴利 黄学勇
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 肠道病毒71型 手足1 2病 TaqMan PCR
• 年，卷（期）: 2010,（8）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用
• 页码范围: 1517-1519,1523
• 分类号: R446
• 语种: 中文

摘要

[目的]建立肠道病毒71型(enterovirus71)核酸的特异、快速、敏感的TaqMan探针PCR检测方法. [方法]根据GeneBank发表的EV71全基因组序列,在其VP1基因区段设计特异的引物与探针;以构建的重组质粒为模板,优化探针和引物浓度、最佳反应条件,建立最优化的实时定量PCR方法,评价其灵敏性、特异性和稳定性. [结果]引物和探针有良好的特异性,使用浓度为为0.8μM和0.4μM,可检测到100个RNA拷贝数,较传统的RT-PCR检测方法敏感性提高了100倍;同一样品Ct值重复检测3次,变异系数小于5%,表明该体系具有较好的稳定性. [结论]本研究建立的肠道病毒EV71-TaqMan荧光定量PCR方法,具有特异、灵敏、快速的特点,适用于由EV71感染引起的手足口病等的实验室早期诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许汴利		148	1187	16.0	24.0
2	李幸乐		31	186	9.0	11.0
3	黄学勇		93	505	10.0	17.0
4	杜燕华		22	210	8.0	14.0
5	卫海燕		20	62	5.0	7.0
6	于贺娟	郑州大学公共卫生学院	1	6	1.0	1.0