小鼠Dppa2基因shRNA载体的构建及干扰效果的检测

• 作者: 卢光琇 杜娟 陈天姬
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: Dppa2 RNA干扰(RNA interference,RNAi) shRNA载体
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 404-407
• 分类号: Q95-3|Q291|Q75
• 语种: 中文

摘要

目的:构建有效的针时小鼠Dppa2基因的shRNA(short hairpin RNA)干扰载体.方法:设计合成2对针对小鼠Dppa2基因的shRNA序列以及1对与哺乳动物基因组无同源性的shRNA序列作为对照,构建pSUPER.Retro.puro干扰载体并进行PCR,酶切和测序验证.进一步将各干扰栽体分别转染小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs),RT-PCR检测干扰效率.结果:PCR,酶切和测序验证均表明各shRNA栽体构建成功.将空载体及各重组栽体分别转染小鼠ESCs发现,干扰组Dppa2基因表达水平相对于空载体对照组和阴性shRNA载体对照组明显下调.结论:成功构建了有效的针对小鼠Dppa2基因的shRNA干扰载体,为进一步研究Dppa2基因在维持小鼠ESCs不分化过程中的作用提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢光琇	中南大学生殖与干细胞工程研究所	208	1251	18.0	24.0
2	杜娟	中南大学生殖与干细胞工程研究所	35	196	7.0	13.0
3	陈天姬	中南大学生殖与干细胞工程研究所	5	2	1.0	1.0