猪圆环病毒2型Cap蛋白的原核表达及其抗原性分析

• 作者: 沈志强 王艳萍 王金良 董林 谢金文
• 来源期刊: 安徽农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒2型(PCV2) 原核表达 抗原性分析
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 55-58
• 分类号: S858.282.65
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中登录的PCV-2序列,设计1对特异性引物,PCR扩增 PCV-2去除核定位信号(nuclear localization signal, NLS)的Cap蛋白基因,经Bam HI和Xho I双酶切后将其插入到表达载体pEGX-4T-1多克隆位点,并转化到表达菌株Rossetta(DM3)中,采用IPTG进行诱导表达,采用SDS-PAGE薄层灰度分析表达情况,收集菌体,使用GST-Protein Purification Kit亲和层析纯化方法对表达的GST-Cap融合蛋白蛋白进行纯化,SDS-PAGE电泳检测纯化效果,Western blot分析纯化后的重组Cap蛋白(rCap)免疫学活性.结果表明,成功克隆了大小为579 bp去除核定位信号的ORF2基因,成功诱导表达出预期大小45.3 ku相一致的rCap蛋白,表达量占总菌体的25%,纯化后的rCap蛋白SDS-PAGE电泳分析纯度达到90%以上,Western blot分析表明纯化的rCap蛋白能与PCV-2阳性血清发生特异性反应,具有良好的免疫学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王金良		154	750	13.0	19.0
2	沈志强		525	1950	18.0	25.0
3	王艳萍		23	46	4.0	6.0
5	董林		24	76	6.0	7.0
6	谢金文		62	253	8.0	12.0