pEGFP-ING4真核表达载体的构建及在人脐静脉内皮细胞中的表达

• 作者: 牛江涛 赵义营 邓跃飞 雷炳喜
• 来源期刊: 中国微侵袭神经外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 生长抑制因子4 内皮细胞 转染 基因表达
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 38-41
• 分类号: R73-3|R739.41
• 语种: 中文

摘要

目的 构建携带生长抑制因子4(ING4)基因的真核表达载体pEGFP-ING4并转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC),为进一步研究ING4对胶质瘤血管生成影响提供基础.方法 提取人胎盘细胞中总RNA,RT-PCR扩增 ING4并克隆至pEGFP-C2载体,酶切电泳鉴定出阳性克隆送测序,利用靶向转染试剂jetPEI-HUVEC转染HUVEC,通过免疫组化检测转染细胞中ING4的表达.结果 成功扩增ING4基因,基因全长747 bp.重组质粒pEGFP-ING4的酶切鉴定及测序结果均证明ING4基因成功克隆到真核表达载体中.酶切片段电泳结果表明:目的 条带与ING4的开放读码框大小相符;测序结果和ING4的开放读码框比对相似性为100%.转染重组质粒后的HUVEC中ING4蛋白表达水平增强.结论 本实验成功构建携带ING4基因的真核表达载体 pEGFP-ING4,并可在HUVEC中获得ING4 蛋白的增强表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邓跃飞	中山大学附属孙逸仙纪念医院神经外科	43	182	8.0	10.0
2	赵义营	中山大学附属孙逸仙纪念医院神经外科	5	14	2.0	3.0
3	雷炳喜	中山大学附属孙逸仙纪念医院神经外科	11	10	2.0	2.0
4	牛江涛	中山大学附属孙逸仙纪念医院神经外科	5	20	2.0	4.0