新基因PRR11的克隆、真核表达载体的构建及鉴定

• 作者: 兰欢 卜友泉 崔涛 徐瑲 郭勇
• 来源期刊: 泸州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: PRR11 pcDNA3.1 真核表达
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 475-479
• 分类号: R34
• 字数: 3988字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2669.2011.05.007

摘要

目的:克隆新基因PRR11的开放阅读框区,构建其真核表达载体,并进行表达检测及鉴定.方法:以HeLa细胞cDNA为模板,半定量RT-PCR扩增PRR11基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.1中,酶切、测序鉴定确认获得PRR11基因的重组真核表达载体pcDNA3.1-PRR11.然后将pcDNA3.1 -PRR11重组载体转染入HeLa细胞中,收集细胞,制备总RNA和细胞裂解液,采用半定量RT-PCR和蛋白质免疫印迹法检测目的基因表达情况.结果:成功扩增了PRR11基因,双酶切、测序鉴定证实目的基因成功克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,测序结果表明序列完全正确,pcDNA3.1 - PRR11真核重组表达载体构建成功.半定量RT-PCR和蛋白质免疫印迹法证实了转染入HeLa细胞中的目的基因表达成功.结论:成功构建了PRR11基因的真核表达载体,并可在HeLa细胞中成功表达,为进一步研究PRR11基因的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭勇	泸州医学院组织胚胎学教研室	80	416	11.0	15.0
2	兰欢	泸州医学院心肌电生理学研究室	7	30	2.0	5.0
3	崔涛	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	4	3	1.0	1.0
4	卜友泉	重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室	51	139	7.0	10.0
5	徐瑲	泸州医学院组织胚胎学教研室	8	54	3.0	7.0