人源S100A1蛋白的表达纯化与鉴定

• 作者: 刘子泉 刘洪涛 张娜 徐传香 王天辉 陈昀贇
• 来源期刊: 解放军预防医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 人源S100A1 pBV220-S100A1表达载体 纯化
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论著
• 页码范围: 240-244
• 页数: 5页
• 分类号: Q51
• 语种: 中文

摘要

目的 构建pBV220-S100A1表达栽体,表达并纯化人源S100A1蛋白,为进一步研究人源S100A1蛋白相关的生物学功能及应用于临床诊断奠定基础.方法 采用全基因合成法合成人源S100A1基因；通过GeneBank查询人源S100A1蛋白的氨基酸序列,进行序列优化设计,同时引入Ecor Ⅰ 和BamH Ⅰ 酶切位点,构建原核表达载体pBV220- S100A1,热应激诱导其在大肠杆菌(E.coli DH 5α)中表达,采用离子交换层析法纯化人源S100A1蛋白,最后采用Tranwell迁移实验检测所纯化蛋白的生物活性.结果 酶切鉴定和测序分析显示,人源S100A1的基因被成功插入pBV220多克隆位点；S100A1的基因片段在pBV220中的插入位点、碱基序列及读码框和终止子的次序完全正确；S100A1的基因序列位于表达载体pBV220的序列下游.经诱导表达和纯化,最终获得了人源S100A1蛋白,且经迁移实验证明,该纯化蛋白具有较高的生物活性.结论 成功建立了人源S100A1蛋白表达载体,表达菌株经诱导表达和纯化,获得了高纯度的蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘洪涛		3	7	1.0	2.0
2	王天辉		3	0	0.0	0.0
3	刘子泉		1	0	0.0	0.0
4	陈昀贇		1	0	0.0	0.0
5	徐传香		1	0	0.0	0.0
6	张娜		1	0	0.0	0.0