单增李斯特菌检测基因芯片的研制与评价

• 作者: 何冬梅 李柏生 杨杏芬 柯昌文 柯碧霞 王洪敏 谭海玲 赖蔚苳 邓小玲
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单增李斯特菌 基因芯片 寡核苷酸探针
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 916-921
• 分类号: R117
• 字数: 4305字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2011.10.015

摘要

目的 研制快速、特异、灵敏的检测单增李斯特菌的基因芯片.方法 选择gyrB、ISR、16S rRNA、23S rRNA、hlyA、iap和prfA作为单增李斯特菌的检测靶基因,研制一种Oligo探针基因芯片,对18个不同种属来源的已知参考生物样品进行检测和鉴定,并且采用对比试验、重复性试验、灵敏度试验和特异性试验对该芯片进行验证评估.结果 通过对比发现IDT合成的70 mer Oligo芯片探针在芯片打印与芯片检测两个方面较优.比较10、40和80 μmol/L 3个Oligo探针点样浓度,结果 显示10 μmol/L的探针点样浓度已能获得很好的芯片检测结果.单增李斯特菌检测芯片具有较好的重复性；样品检测绝对量下限为0.9 ng DNA左右.结论 Oligo基因芯片可以快速准确地检测单增李斯特菌.