实时荧光定量PCR法检测RNA干扰后的GES-1细胞中MYCT-1基因的表达

• 作者: 刘佳 刘政 邱广斌
• 来源期刊: 分子诊断与治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: MYCT-1基因 RNA干涉 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 93-95
• 分类号: R4
• 字数: 2019字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6929.2011.02.006

摘要

目的 建立MYCT-1基因的实时荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR,RFQ-PCR)检测方法,检测RNA干扰(RNA interference,RNAi)后GES-1细胞中MYCT-1 mRNA 的表达水平,探讨不同剂量siRNA对MYCT-1基因的沉默效果.方法 取5×104对数生长期GES-1细胞,分别转染1 μg、2 μg、4 μg siRNA.转染第4天分别收集细胞提取总RNA,合成cDNA并进行RFQPCR检测,以未转染组作为对照.结果 加入1 μg、2 μg组MYCT-1表达量分别降低19.4%和55.2%,加入4 μg siRNA组细胞死亡.结论 成功建立了 MYCT-1基因的RFQ-PCR检测方法.加入2 μgsiRNA,脂质体与siRNA比例为4:1时,可使GES-1细胞中MYCT-1表达降低55.2%,为最佳实验条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘佳		88	305	10.0	14.0
2	邱广斌		22	81	5.0	8.0
3	刘政		29	38	3.0	5.0