果蝇唾液腺特异基因CG8419多克隆抗体的制备及检测

• 作者: 吴秀山 周煌 唐雄卓 彭夕洋 王琨 王跃群 闵璐 陈婷芳
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: CG8419 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 111-114
• 分类号: Q71
• 字数: 3065字
• 语种: 中文

摘要

果蝇CG8419基因与脊椎动物中TRIM45基因为同源基因.以果蝇cDNA为模板通过PCR扩增出亲水性和特异性好的果蝇CG8419基因片段,将其克隆入表达载体PET-28a,构建出重组表达质粒PET-28a-CG8419.将重组质粒转化大肠杆茵Rosetta,经IPTG诱导出带His标签的重组融合蛋白.通过尿素洗涤包涵体并切胶回收纯化融合蛋白,然后再免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.Western blot实验分别验证抗体的效价和特异性.果蝇胚胎抗体染色显示该基因在果蝇唾液腺中表达.