红色亚栖热菌海藻糖合酶在大肠杆菌中的表达及其酶学性质分析

• 作者: 刘艳超 张娟 张峻 朱玥明 李明春 王宇凡 王文文 邢来君
• 来源期刊: 南开大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 红色亚栖热菌 海藻糖合酶(TreS) 表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 页码范围: 90-97
• 页数: 8页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

利用前期克隆得到的红色亚栖热菌CBS-01 (Meiothermus ruber CBS-01)的海藻糖合酶基因(TreS),构建天然蛋白异源宿主表达载体并在大肠杆菌中获得较高的表达量.经纯化后测定该酶在pH 6.5,反应温度为50℃时活性最高.酶学性质的研究表明,TreS的最适底物为麦芽糖,其对麦芽糖的转化效率约是海藻糖的2.5倍；该酶在30～60℃、pH 3.5～9.0范围内都保留较高的酶活；2 mmol/L的一价阳离子Na+、K+对TreS有激活作用；低温有利于反应向海藻糖方向进行,并能减少葡萄糖副产物的生成；20℃时,几乎没有葡萄糖生成,麦芽糖至海藻糖的转化率可达65％.为工业化大规模生产海藻糖奠定了理论基础.