嗜热栖热菌热稳漆酶在大肠杆菌中的高效表达

• 作者: 李华钟 邵蔚蓝 郑志强
• 来源期刊: 工业微生物
• 关键词: 大肠杆菌 漆酶 选择性密码子优化 嗜热栖热菌
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-8
• 页数: 8页
• 字数: 4750字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2013.04.001

摘要

通过对漆酶成熟肽编码序列的N端(Gln2-Val84)及中部一富含GC碱基区域(Gly278-Pro303)进行密码子优化,成功实现嗜热细菌嗜热栖热菌Thermus thermophilus HB27胞内产极耐热漆酶在大肠杆菌宿主内的超量表达,热激诱导表达后细胞提取液中漆酶活性从(20.7±1.5)U/L升高到(1790.2±81.6)U/L,重组蛋白表达水平提高了86倍.利用全蛋白的极端耐热性,采用两步纯化方法(85℃热预处理和疏水柱层析),获得电泳纯的重组酶蛋白,比酶活为14 U/mg,最终收率为62％.这是首次报道采用pHsh热激表达系统实现该极耐热性细菌漆酶在大肠杆菌宿主体内的高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵蔚蓝	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	54	772	16.0	25.0
5	李华钟	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	63	592	13.0	22.0
9	郑志强	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	4	37	2.0	4.0