西洋杜鹃ISSR-PCR反应体系的建立及优化

• 作者: 何天友 荣俊冬 郑宇 郑郁善 陈凌艳 陈礼光
• 来源期刊: 福建林学院学报
• 学科: 农学
• 关键词: 西洋杜鹃 简单序列重复区间 反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 126-130
• 分类号: S685.21
• 字数: 3615字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-389X.2011.02.007

摘要

以西洋杜鹃(Rhododendron hybridum)叶片提取的基因组DNA为材料,用引物UBC880(序列为GGA GAG GAG AGG AGA)研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度对该种植物ISSR扩增结果的影响.确立了可用于西洋杜鹃ISSR-PCR 分析的最适宜的PCR反应体系:20μL PCR反应体积中,含10ng模板DNA,0.25mmol·L-1 dNTPs,2.0 mmol·L-1 Mg2+,1.0U Taq DNA聚合酶,0.4 μmol·L-1引物,并确定引物UBC 880的最适退火温度为54.4℃.PCR扩增程序:94℃预变性5 min,94℃变性45 s,54.4℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,共40个循环后,72℃延伸7 min,4℃保存.应用该ISSR体系对11份西洋杜鹃种质进行了扩增,证实了该体系的适用性和稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑郁善	福建农林大学园林学院	303	2600	26.0	39.0
5	陈礼光	福建农林大学工业原料林研究所	136	1297	21.0	30.0
6	荣俊冬	福建农林大学工业原料林研究所	178	835	14.0	19.0
7	郑宇	福建农林大学园林学院	20	147	6.0	11.0
9	何天友	福建农林大学园林学院	110	409	10.0	14.0
10	陈凌艳	福建农林大学园林学院	72	320	10.0	14.0