大鼠SOCS3腺病毒的构建及鉴定

• 作者: 惠智艳 梁潇 袁祖贻 贺明 陈涛
• 来源期刊: 陕西医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: @SOCS3 @腺病毒 @基因转染 大鼠
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1443-1446
• 分类号: R372
• 字数: 3089字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7377.2011.11.001

摘要

目的:构建大鼠细胞因子信号途径抑制物3 (SOCS3)腺病毒载体,并对腺病毒感染后的HEK293细胞的SOCS3表达情况进行观察.方法:提取大鼠腹腔巨噬细胞中总RNA,克隆出SOCS3基因,亚克隆于含有GFP报告基因的穿梭质粒pAdtrack-CMV,通过pAdeasy-1腺病毒系统将含有目的基因的穿梭质粒和骨架质粒共转入BJ5183感受态细胞.线性化重组的病毒转染入HEK293细胞,并在其中对重组的腺病毒进行包装及扩增.结果:构建的大鼠SOCS3腺病毒能够高效率的感染HEK293细胞,mRNA和蛋白水平均证实SOCS3表达显著增加.结论:大鼠SOCS3腺病毒载体构建成功,可用于体内转染或细胞试验的进一步研究.