淡水小龙虾主要过敏原原肌球蛋白基因的克隆、表达及其免疫活性鉴定

• 作者: 倪健波 冼静雯 刘志刚 吕志平 朱海 杨文潮 王建峰 黄素文
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 淡水小龙虾 过敏原 原肌球蛋白 免疫活性
• 年，卷（期）: 2011,（7）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 642-647
• 分类号: R392.11
• 字数: 5165字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2011.07.015

摘要

目的:克隆、表达淡水小龙虾肌肉中主要过敏原原肌球蛋白(tropomyosin),并对其免疫活性进行鉴定.方法:根据甲壳类的泛过敏原tropomyosin基因的高度保守性设计简并引物,通过RT-PCR克隆出淡水小龙虾虾肉中过敏原tropomyosin的全长基因.将该基因与pET-28a载体连接并转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经诱导异丙基-B-D-硫代乳糖苷(IPTG)诱导表达,Ni2+亲和层析柱纯化后,用Western blot检测该重组蛋白的免疫活性.结果:序列分析显示该基因包括一个编码284个氨基酸的开放阅读框,与已知虾、蟹、龙虾等的过敏原tropomyosin基因有较高同源性(>80%).根据过敏原的命名规则,将其命名为Pro c 1,并提交GenBank数据库,登录号为FJ769183.重组小龙虾tropomyosin在大肠杆菌中能高效的表达,Western blot检测结果显示该重组蛋白具有良好的免疫活性.结论:研究成功表达了具有免疫活性的淡水小龙虾原肌球蛋白,为虾过敏性疾病的诊断和治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘志刚	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	324	1724	17.0	23.0
2	黄素文		15	84	5.0	8.0
3	倪健波		16	63	5.0	7.0
4	吕志平		14	79	4.0	8.0
5	朱海		17	178	10.0	13.0
6	王建峰		12	64	4.0	7.0
7	杨文潮		7	25	2.0	5.0
8	冼静雯	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	2	30	2.0	2.0